При изложении общих представлений о процессе распознавания дана частичная характеристика субпопуляции лимфоцитов, известных как естественные киллерные Т-лимфоциты (ЕКТ) (NKT). Как отмечалось, эта субпопуляция отличается от других лимфоидных клеток экспрессией инвариантной цепи TCR - Va24 (на ЕКТ человека), Vв14 (на ЕКТ мышей) и маркеров естественных киллеров (ЕК) .
В настоящее время известно, что гены, кодирующие эту цепь у мышей, идентифицированы (Vв14, а также 2-йи 3-й сегменты гена J281). ЕКТ есть не только в периферической крови, но и в большинстве тканей (печень, костный мозг, селезенка, тимус), участвуют в различных процессах, включая врожденный и адоптивный иммунитет, аутоиммунную патологию, регрессию опухоли, формирование толерантности и др.
Выше упоминалось также, что вначале естественные киллерные Т-лимфоциты были определены как двойные негативные Т-лимфоциты - CD4-CD8-, однако в последующем определили, что отдельные клоны этих клеток могут экспрессировать один из указанных антигенов.
ЕКТ человека преимущественно экспрессируют антиген CD8 и имеют фенотип: CD28-CD45RA-CD45RO+CD69+; экспрессируют различные рецепторы ЕК (CD16, CD56, CD161, NKG2D и др.), а также и рецепторы, которые взаимодействуют с антигенами I класса главного комплекса гистосовместимости (ГКГ) (CD158a, CD158b, KIR3DR, CD94). Специфическим лигандом ЕКТ, как отмечалось, является аGal-Cer, представленный молекулами CDld и известный как активатор перфоринзависимой цитотоксичности против опухолевых клеток различных линий.
В предыдущей части указывалось, что существуют различные клоны ЕКТ. К этой информации следует добавить, что имеются также клоны клеток, различающиеся и по уровню цитотоксичности. Этот факт имеет важное значение для понимания противоопухолевого действия естественных киллерных Т-лимфоцитов и поэтому обсуждается в данном разделе.
Так, выделена субпопуляция CD8+CD56+, клетки которой способны проявлять высокий уровень цитотоксичности, в связи с чем, по мнению авторов, должны занять надлежащее место в адоптивной иммунотерапии.
Эти же авторы описали и другую субпопуляцию - CD3+CD56+, клетки которой в условиях стимуляции анти-СD3, супернатантами аллогенных клеток, а также другими стимуляторами активно лизируют аллогенные опухолевые клетки, включая клетки колоректального рака, рака яичника, молочной железы, легкого, поджелудочной железы, меланомы и др.
На высокую цитотоксичность ЕКТ, экспрессирующих CD56, указывают и другие авторы, отмечая, что такой клон ЕКТ может занять должное место в адоптивной иммунотерапии рака.
В эксперименте с опухолями мышей выявлена субпопуляция ЕКТ, ко-экспрессирующая CD8+ и CD161 (NK1.1). При долгосрочном культивировании, поддерживаемом IL-4, NK1.1+CD8+ проявляют выраженную ЕК-подобную цитотоксическую активность против множества опухолевых мишеней, лизис которых не зависит от классических и неклассических молекул (Qa, Т1) ГКГ.
Эти клетки экспрессируют Vвl4 цепь TCR и представляют собой уникальную субпопуляцию Т-лимфоцитов с неизвестной рестрикцией. Их цитотоксическая активность усиливается при наличии В.7-молекул на опухолевых клетках. Предполагается также, что эти клетки могут функционировать как часть врожденного иммунитета с большими потенциями в защите против опухолевого роста.
Особенности естественных киллерных Т-лимфоцитов
Одной из важнейших особенностей естественных киллерных Т-лимфоцитов является способность их трансформации в дендритные клетки (ДК) под влиянием GM-CSF с быстрой экспрессией HLA-DR, ко-стимулирующих молекул CD80 и CD86, а при длительном культивировании - в наивные Т-лимфоциты. Именно эти особенности определяют роль ЕКТ в инициации и контроле первичного иммунологического ответа, что схематически представлено на рис. 23.Рис. 23. Возможность трансформации ЕКТ в наивные Т-лимфоциты
Лишь в последние годы появились работы, которые не только подтверждают важную роль ЕКТ в элиминации различных опухолевых клеток при спонтанных опухолях как индуцированных, так и метастазируюших.
Существенный вклад в понимание роли ЕКТ, а также ЕК, был внесен различными исследователями, среди которых прежде всего следует упомянуть М. Smyth, К. Takeda, Y. Hayakawa, Т. Kobayashi, Т. Каwano и др. В результате сформировался ряд представлений, отражающих участие естественных киллерных Т-лимфоцитов в противоопухолевой защите и раскрывающих особенности механизма их действия в отношении злокачественно трансформированных клеток.
Важная роль ЕКТ, согласно сложившемуся представлению, заключается в том, что активированные ЕКТ осуществляют контроль за инициацией и развитием метастазов, лизируют многие вновь возникшие опухолевые клетки, что происходит в результате перераспределения TCR, секреции IFNy, GM-CSF.
В регуляции цитотоксической активности ЕКТ одно из центральных мест принадлежит цитокинам, в частности IFNy и IL-12, усиливающих экспрессию перфорина и FasL. Активированные естественные киллерные Т-лимфоциты продуцируют широкий спектр цитокинов: IL-4, IFNy, TNFa, IL-10, IL-13 и GM-CSF.
В общем перечне цитокинов, имеющих значение для функционирования ЕКТ, особое место занимает IL-12, поскольку эти клетки экспрессируют рецепторы к упомянутому цитокину, а его продукция чрезвычайно важна для взаимодействия ЕКТ с ДК.
Представляют интерес данные, что ЕКТ постоянно экспрессируют рецепторы для IL-12 и IFNy, а IL-12 усиливает продукцию перфорина этими клетками. Приведенные данные объясняют, почему естественные киллерные Т-лимфоциты рассматриваются как основная мишень для интерлейкина, обусловливающего цитотоксичность ЕКТ, и его постоянное наличие необходимо для их противоопухолевой активности, что показано в отношении многих опухолей.
Для цитотоксичности, обусловленной как ЕКТ, так и ЕК, важную роль играют IFNy и перфорин. Изучение роли последних показало, что существует определенная дифференциация участия этих клеток в опухолевом процессе.
В последнее время установлено, что IFNy может влиять на цитотоксичность, однако на модели индуцированной фибросаркомы доказано, что IFNy, а не перфорин, контролирует появление сарком. Однако в последующем они независимо контролируют противоопухолевые эффекторные функции ЕКТ, обеспечивающие контроль за ростом и распространением опухоли.
В индукции активности естественных киллерных Т-лимфоцитов важное место принадлежит также IL-2 и IL-15, которые являются их ростовыми факторами, как и для ЕК, цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ) . Эти цитокины действуют на различные стадии иммунологического ответа путем частичной активации ЕКТ, не влияя на баланс Тh1, Th2 цитокинов. К особенностям регуляторных влияний IL-2 и IL-15 относится то, что наряду с ко-стимулирующим влиянием на функции других клеток они дополнительно осуществляют контроль за их развитием и надзор не только за ЕКТ, но и ЕК, и интраперетониальными лимфоцитами.
В действии IL-2 и IL-15 на ЕКТ существуют и определенные различия, которые, очевидно, обусловлены их гетерогенностью и характеризуются неодинаковой чувствительностью к действию этих интерлейкинов. Например, IL-2 индуцирует пролиферацию ЕК, СD54+Т-лимфоцитов, но не влияет на CD56-, в то время как IL-15 индуцирует экспансию уб-цепи СD8+Т-лимфоцитами и пролиферацию CD56+-клеток. Оба цитокина стимулируют цитотоксичность ЕК и CD56+ против клеток линии К562, но не влияют на продукцию IFNy, TNFa, IL-2.
Сравнительно недавно показано, что естественные киллерные Т-лимфоциты и 1L-12 играют ключевую роль в защите от спонтанных опухолей, а также опухолей, индуцированных таким химическим канцерогеном, как метилхолантрен, что показано в опытах с индуцированной фибросаркомой. Этот эффект действия ЕКТ на клетки фибросаркомы осуществляется с участием перфорина и IFNy.
Наряду с доказательствами способности ЕКТ продуцировать большие количества соответствующих цитокинов, установлена и ко-стимулирующая роль взаимодействия CD28-CD80/CD86, а также CD40-CD54 в продукции IL-4 и IFNy.
Выявлено, что взаимодействие между указанными ко-стимулирующими молекулами осуществляется различными сигналами, требующими дифференцированного участия соответствующих цитокинов. К этому следует добавить, что цитотоксичность ЕКТ усиливается экспрессией ко-стимулирующих молекул класса В.7, многие из которых присутствуют на опухолевых клетках.
Наряду с признанием бесспорной значимости Va24 TCR, CDld и aGal-Cer предполагается, что их роль не абсолютна. Это подтверждается результатами изучения разнообразных злокачественно трансформированных гемопоэтических клеток, лизис которых осуществляется ЕКТ с использованием механизмов, отличающихся от таковых ЦТЛ- и ЕК-обусловленного лизиса.
Такие данные обосновывают применение специфических стимуляторов естественные киллерных Т-лимфоцитов, которые могут иметь терапевтическое значение.
Вполне естественно, что одним из центральных вопросов в изучении ЕКТ является выяснение механизма их цитотоксического действия. Обобщив пока еще немногочисленные данные по этому вопросу, можно констатировать, что ЕКТ способны использовать различные механизмы цитотоксичности - перфорин- и FasL-зависимые, действие цитокинов.
Способность ЕКТ к FasL-зависимой цитотоксичности впервые зарегистрирована в 2000 г., когда было показано, что естественные киллерные Т-лимфоциты от FasL-дефицитных мышей снижают уровень своей активности, a IL-12 и IL-18 регулируют экспрессию Fas и FasL.
Поскольку специфическим лигандом для ЕКТ служит аGal-Cer, то именно он очень часто используется для изучения противоопухолевой активности ЕКТ и механизма их цитотоксичности. С учетом проведенных исследований в настоящее время стало известно, что один из основных эффектов аGal-Cer является его антиметастатическое действие.
Указанный эффект связывают со способностью аGal-Cer активировать естественные киллеры и ЕКТ с последующим выделением IFNy преимущественно перфоринзависимым путем, усилением экспрессии IL-12R на ЕКТ. Антиметастатический эффект снижается у ЕК- и IFNy-дефицитных мышей. К этому следует добавить, что Gal-Cer является синергистом с IL-12 в активации естественных киллерных Т-лимфоцитов и продукции IFNy in vivo.
Дальнейшее изучение показало, что аGal-Cer - также важный фактор ингибиции ангиогенеза, что в конечном итоге позволило авторам охарактеризовать его как фактор ангиогенеза и ингибиции роста опухоли.
Интерес к использованию аGal-Cer при изучении ЕКТ объясняется тем, что он может быть объектом быстрого распознавания ЕКТ, которые уже через 12 ч после взаимодействия с ним (при условии добавления в культуру IL-4) начинает быстро продуцировать цитокины. Нагружение дендритных клеток аGel-Cer приводит к пролонгированному ответу, продукции больших количеств IFNy и развитию выраженной резистентности к метастазированию, в частности меланомы В16.
Дополнением к этим данным могут служить и результаты исследований, проведенных на нормальных и ЕКТ-дефицитных мышах, обработанных аGal-Cer. Было отмечено, что в этих условиях усиление ЕКТ-активности сопровождается ингибицией дифференцировки Тh2-лимфоцитов и последовательным снижением продукции IgE на фоне выраженного увеличения количества IFNy.
Авторы также отмечают, что у ЕКТ-дефицитных мышей стимуляция аGal-Cer сопровождается увеличением продукции IgE. Представляет интерес заключение авторов, что продукция IL-4 ЕКТ имеет незначительное влияние на дифференцировку Тh2-лимфоцитов.
Противоопухолевый эффект аGal-Cer
Заслуживают внимания данные о том, что противоопухолевый эффект аGal-Cer обусловлен последовательным воздействием на эффекторные лимфоциты, участвующие в формировании как врожденного, так и приобретенного иммунитета, индуцирует активацию иммунорегуляторных клеток, а эффект этого гликолипида усиливается в связи с его способностью активировать не только ЕКТ, но и цитотоксические лимфоциты.В опытах по изучению клеток миелоидной лейкемии, которые экспрессируют CDld, и с использованием aGal-Cer показано, что в подавляющем большинстве случаев цитотоксичность ЕКТ обусловлена перфорином и гранзимом В, a TNFa, FasL и TRAIL усиливали киллинг. При этом был установлен факт, заслуживающий несомненного внимания: CD56+EKT экспрессируют много перфорина и поэтому проявляют большую цитотоксичность в присутствии aGal-Cer. Обобщив полученные данные, авторы отметили, что экспрессия CDld стадио-специфична для клеток миелоидной лейкемии и может быть мишенью для ЕКТ-иммунотерапии.
Использование aGal-Cer позволило М. Smyth и соавт. впервые показать, что ЕКТ способны проявлять противоопухолевое действие и в отсутствие стимуляции этим гликолипидом, а также IL-12. Именно этот факт позволил авторам предположить, что ЕКТ могут играть решающую роль в формировании иммунологического ответа при спонтанных опухолях, в частности при слабоиммуногенных саркомах, однако вопрос о том, какова их роль в противоопухолевом ответе на иммуногенные опухоли в настоящее время остается открытым.
Значительный интерес представляют результаты исследований, выполненных М. Smyth и N. Crowe, которые во многих случаях использовали модель адоптивного переноса ЕКТ или ЕК, активированных aGal-Cer, ЕКТ- и lFNy-дефицитным мышам. В частности, на модели МХ-фибросаркомы показано, что в условиях адоптивного переноса ЕКТ-нормальным ЕКТ-дефицитным (TCRJa281), ЕКТ клеткам принадлежит существенная роль в выживаемости животных даже при отсутствии экзогенных стимулирующих факторов.
Продолжая изучение противоопухолевых эффектов ЕКТ, активированных aGal-Cer, авторы отмечают, что продукция IFNy (опыты на IFNy-дефицитных мышах) абсолютно необходима для восстановления антиметастатической активности ЕКТ, что показано на модели метастазов селезенки и печени.
Сравнительная оценка антиметастатического действия ЕКТ, активированных aGal-Cer, позволила авторам доказать, что оно осуществляется с участием различных механизмов (продукция перфорина, экспрессия FasL и TNFa).
В высшей степени интересными оказались данные, свидетельствующие о том, что эффект ЕКТ во многом определяется особенностями микроокружения: для оптимальной продукции IFNy, определяемого в сыворотке крови, необходима стимуляция IL-18 и IL-12, в то время как продукция IL-18 в легких не является необходимой.
Использование комплекса CDld/aGal-Сеr-тетрамера и высокоочищенных ЕКТ дало основание заключить, что ЕКТ мышей обладают возможностью прямого и опосредованного действия на опухолевые клетки.
В опытах с клетками нейробластомы показано, что прямой путь повреждения связан с взаимодействием ЕКТ с мишенями, экспрессирующими CDld, а непрямой - с выделением стимулированными ЕКТ IL-2. Несмотря на убедительность фактов о роли ЕКТ в лизисе опухолевых клеток, высказано предположение, что этот лизис не во всех случаях является основным механизмом даже при условии быстрой активации естественных киллерных Т-лимфоцитов после стимуляции aGal-Cer.
Такое предположение основано на том, что даже активированные ЕКТ не проявляют цитотоксичности против некоторых опухолей. Следует также принять во внимание, что подобно другим клеткам действие ЕКТ в противоопухолевой защите неоднозначно, и если в отношении одних опухолей, например индуцированных метилхолантреном, они проявляют выраженное противоопухолевое действие, то в других - защищают опухоль, что согласуется с приведенными выше данными о возможном негативном влиянии ЕКТ.
Для усиления активности естественных киллерных Т-лимфоцитов начали использовать не только aGal-Cer, но и другие соединения. К их числу относится и мономерный пептидогликан, обладающий иммуностимулирующей активностью, которая усиливается при добавлении цинка. Под влиянием мономера пептидогликана и цинка существенно повышаются генерация и цитотоксичность ЕКТ.
К числу указанных соединений относятся и а-галактозилкерамид (разновидность гликолипидов), который обладает противоопухолевой активностью в отношении многих опухолей и повышает активность ЕКТ. Этот гликолипид уже нашел применение в клинике, и его использование в отдельных больных повышало уровень TNFa, GM-CSF, а при преобработке ЕКТ а-галактозилкерамидом у части больных раком восстанавливался дефицит ЕКТ.
Антиметастатическое действие еще одного соединения - CpG-содержащий ДНК (CpG-ODN), зарегистрировано на различных метастазирующих опухолях (фибросаркома, тимома и др.).
Установлено, что этот олигонуклеотид активирует антиметастатическое действие естественных киллерных Т-лимфоцитов и ЕК, которое авторами рассматривается как опосредованное, связанное с индукцией IFNap. Такой эффект позволяет рекомендовать указанный препарат для иммунотерапии.
Далее, перитуморальное введение CpG-ODN мышам с меланомой, различающихся по количеству ЕКТ (атимические мыши; мыши с высоким уровнем ЕКТ; мыши с отсутствием экспрессии CD1, имеющие строго выраженное снижение числа ЕКТ; мыши линии С57В1/6).
В результате установлено, что опухолевый рост значительно ингибировался у мышей как с высоким, так и с низким содержанием естественных киллерных Т-лимфоцитов. У мышей двух линий со сниженным количеством ЕКТ наблюдались различия в уровне ингибиции CpG-зависимого роста, а у мышей с отсутствием молекул CD1 ингибиция была очень резко выражена и коррелировала с высоким соотношением продукции IFNy и IL-4 в ответ на CpG по сравнению с мышами других линий.
Такая гетерогенность модельных систем стала основанием для вывода о том, что молекула CD1 при определенных условиях может играть негативную регуляторную роль в противоопухолевой активности ЕКТ, поскольку индуцирует сигналы, супрессирующие их активность.
Данные цитируемой выше работы, опубликованной в последнее время, свидетельствуют, что участие молекул CD1 в распознавании антигенов может оказывать негативное влияние для осуществления их цитотоксичности, и есть основания полагать, что такой характер влияния связан с особенностями антигена. Отсутствие аналогичных данных в литературе исключает возможность каких-либо обобщений по этому вопросу, но привлекает внимание к неоднозначности участия CD1 в представлении антигена ЕКТ.
В конце 1990-х годов на модели с меланомой В16 получены данные, позволившие предположить, что эффекторный механизм естественных киллерных Т-лимфоцитов отличается от такового ЕК. В связи с этим возник интерес к сравнительной оценке действия ЕКТ и ЕК.
Сравнительное изучение показало, что существуют определенные различия в реализации и условиях цитотоксичности этих клеток. Первые исследования подтвердили различие цитотоксичности, обусловленной ЕК и ЕКТ. Это проявилось в том, что в отличие от естественных киллеров ЕКТ повреждают мишень в результате прямого взаимодействия CDld и V14 TCR.
Доказано, что при стрессе увеличивается число как ЕК, так и естественных киллерных Т-лимфоцитов, однако его супрессирующее влияние проявляется только в отношении ЕК - факт, свидетельствующий о том, что в ответ на стресс ЕК и ЕКТ включают различные механизмы. Свидетельством последнего являются опыты по изучению этих клеток в печени, подтвердивших, что в основном цитотоксичность естественных киллеров обусловлена перфорином, а ЕКТ-FasL.
Различный характер ответа ЕКТ и ЕК проявляется и под влиянием IL-18, который усиливает врожденный иммунитет против многих опухолей, что доказано исследованиями на моделях различных опухолей мышей. Установлено, что удаление ЕК, но не естественных киллерных Т-лимфоцитов, значительно снижает ЕК-индуцированную цитотоксичность, и под воздействием IL-18 наблюдается выраженное уменьшение количества метастазов при меланоме В16, обусловленное преимущественно ЕК.
Подобно ЕК ЕКТ участвуют в регуляции антиметастатического ответа, индуцированного IL-12, однако в отличие от естественных киллеров этот ответ ЕКТ (цитотоксичность) индуцируется более низкими дозами IL-12. Эффект IL-12 снижается у ЕКТ-дефицитных мышей, а адоптивный перенос ЕКТ, но не ЕК, существенно повышает эффективность воздействия IL-12 на таких мышей (RAC-2). На основании полученных данных авторы пришли к заключению, что естественные киллерные Т-лимфоциты способны отвечать на низкие дозы IL-12.
Весьма интересна точка зрения о том, что если противоопухолевый эффект при действии IL-12 обеспечивается преимущественно ЦТЛ, то его антиметастатическое действие во многом обусловлено ЕКТ.
Этому факту авторы цитируемой работы дают следующее объяснение: IL-12 индуцирует Т-клеточную пролиферацию на ранних этапах, которая резко снижается в последующем, в то время как IL-12-индуцированная цитотоксичность, обусловленная ЕК и ЕКТ, не снижена даже на стадии распространенного опухолевого процесса, что обосновывает рациональность использования IL-12 особенно при лечении метастазов в печени.
В общем понимании механизма действия ЕКТ представляют интерес и данные о том, что их адоптивный перенос активирует ДК и усиливает взаимодействие между дендритными клетками, естественными киллерами и ЕКТ.
Несмотря на то что естественные киллерные Т-лимфоциты сравнительно недавно стали объектом интенсивного внимания, уже имеются некоторые результаты изучения этих клеток у онкологических больных. Однако они пока еще не дают возможности однозначно оценить состояние ЕКТ у этих больных.
По данным одних авторов, ЕКТ, а также ДК функционально не изменены даже на этапе выраженного развития опухолевого процесса, что показано при исследовании больных меланомой. По данным других авторов, функция ЕКТ у больных раком снижена по сравнению с их функцией у здоровых лиц, и это может быть основой для самостоятельного воздействия на опухолевые мишени как нового метода лечения. Изменения ЕКТ при некоторых формах рака, апластической анемии и другой патологии могут проявляться и в уменьшении их общего числа.
Параллельными исследованиями функций естественных киллерных Т-лимфоцитов у больных и здоровых лиц выявлены различия в ответе ЕКТ на стимуляцию aGal-Cer in vitro. Оказалось, что ЕКТ в нефракционированной фракции слабо отвечают на стимуляцию по сравнению с ЕКТ здоровых лиц. В высшей степени интересным представляется тот факт, что при уменьшении числа клеток они сохраняют цитотоксичность против опухолевых мишеней, могут пролиферировать в ответ на aGal-Cer, а исходно сниженная способность к пролиферации восстанавливается у больных раком под влиянием aGal-Cer.
Немногочисленные данные позволяют предполагать, что aGal-Cer имеет перспективы для использования в различных видах иммунотерапии рака (адоптивная, непосредственное воздействие in vivo) при условии достаточно четкого определения соответствующих показаний.
Подводя итоги по имеющемуся фактическому материалу, особое внимание следует обратить на следующие факты. Естественные киллерные Т-лимфоциты - сравнительно недавно выявленная субпопуляция лимфоцитов, способных лизировать различные опухолевые клетки.
Значение ЕКТ в противоопухолевой защите связано не только с их способностью к лизису различных опухолевых мишеней, но также и с тем, что они участвуют в активации других цитотоксических клеток - ЦТЛ и ЕК.
Основой мощного цитотоксического потенциала этих клеток является их способность реализовывать этот потенциал с помощью различных механизмов, что позволяет им осуществлять свое цитотоксическое действие прямым и непрямым путем. Общая характеристика ЕКТ представлена в табл. 3.
Таблица 3. Общая характеристика естественных киллерных Т-лимфоцитов (ЕКТ)
Способность лизировать опухолевые клетки различного генеза, осуществлять контроль за метастазированием и участвовать в формировании врожденного и приобретенного иммунитета дает основания согласиться со многими авторами, которые рассматривают эти клетки как уникальную субпопуляцию лимфоцитов. Именно такой взгляд на естественные киллерные Т-лимфоциты является убедительной аргументацией в пользу того, что селективное воздействие на ЕКТ может стать новым подходом к иммунотерапии рака.
Изложенный материал может быть обобщен таким образом:
1. Естественные киллерные Т-лимфоциты - гетерогенная субпопуляция клеток, которые экспрессируют маркеры ЕК, ЦТЛ, инвариантную цепь TCR, обладают выраженным цитотоксическим действием в отношении различных первичных и метастазирующих опухолей.
3. В реализации цитотоксической активности естественных киллерных Т-лимфоцитов используются различные механизмы с участием перфорина, гранзимов, экспрессией FasL и продукцией цитокинов.
4. Индукция цитотоксичности ЕКТ и ее уровень обеспечиваются цитокинами, из числа которых доминирующее положение занимают IFNy, IL-12, IL-15.
5. Селективным индуктором цитотоксичности ЕКТ служит их специфический лиганд - гликолипид aGal-Cer, который может быть использован для активации цитотоксичности ЕКТ в иммунотерапии больных раком.
Бережная Н.М., Чехун В.Ф.
В строительном гипермаркете, в отделе крепежа, Вы увидите красочные упаковки с торговым брендом "ЕКТ". Многообразие товаров в отделе, привлекательный внешний вид, удобство упаковки, возможность видеть непосредственно товар, а не только надпись на этикетке, фирменный зеленый цвет и удобное расположение товаров по группам, не только радует Ваш глаз, но и делает поиск нужного товара быстрым. Пройдя весь отдел, Вы найдёте крепёжные элементы, которые давно искали и нигде не могли купить. Воображение поражается многообразием и размерным рядом, представленного в отделе крепежа: саморезы, шурупы, болты, винты, шайбы, гайки, заклёпки, анкера, гвозди, дюбеля - всевозможной конструкции и назначения. Под брендом "ЕКТ", Вы также найдете грузовой крепёж, крепёжные пластины, ручной инструмент и другие сопутствующие товары.
ООО "Европейские Крепежные Технологии" - компания (владелец бренда "ЕКТ"), уже 5 лет на рынке крепежа в нашей стране.
"ЕКТ" - так называется наш бренд.
"ЕКТ" - так мы, сокращённо для себя и клиентов, называем и нашу компанию.
"ЕКТ"
- это команда профессионалов, увлечённых и работоспособных людей, которые трудятся, чтобы наполнить рынок профессиональным крепежом разных производителей из многих стран, выбирая и контролируя качество и стоимость выпускаемой продукции, вводя на рынок новые продукты и инновации в мире крепежа.
ООО "Европейские Крепёжные Технологии" с 2010 года поставляют не только крепёж "ЕКТ", но и весь спектр ручного инструмента для строительства и ремонта, садово-огородный инвентарь. В нашем ассортименте: кисти, валики, ключи, плоскогубцы, отвёртки, ленты, лопаты, грабли, вилы и всё то, что необходимо для строительных, монтажных работ и работ по саду и огороду. TOPEX, HARDY, GRAPHITE, K2, KUSSNER, VERTO, SCLEY, NEO, FLO, ECOTEC
- торговые марки инструмента, поставляемого нашей компанией.
Более 10 тыс. наименований товаров в ассортименте компании, цех фасовки товаров, большой склад, ежедневная доставка товаров по всей стране, современная система продаж, включающая электронное оформление заявок, быстрая коммуникация "Клиент - Отдел продаж - Склад", сайт компании ekt
.
by
- всё это сделано для быстрого обслуживания наших клиентов. А наши клиенты, это - магазины, строительные и снабженческие организации, промышленные предприятия и другие потребители по всей территории Беларуси.
Постоянный контроль качества поставляемого крепежа и инструмента осуществляется специальной службой предприятия. Технические параметры продукции определяются на специальном измерительном оборудовании и испытательных стендах. В подтверждение качества продукции ведутся специальные испытания в аккредитованных лабораториях и получены акты и протоколы испытаний, сертификаты соответствия, технические свидетельства Министерства архитектуры и строительства Республики Беларусь.
Наша компания постоянно развивается, быстро реагируя на запросы потребителя. Оптимальное соотношение цены и качества предлагаемых нами товаров привлекает широкий круг покупателей и дает благодатную почву для дальнейшего развития. Ассортимент товаров, складской запас продукции, ежедневная доставка товаров по республике, выставочное и торговое оборудование для клиентов, современная упаковка и отличный сервис - это конкурентные преимущества нашей компании.
Мы стремимся стать лучшей компанией на рынке и строить бизнес совместно со своими клиентами.
заместитель директора Центра управления проектами Корпоративного университета ОАО «РЖД»
Назначение на должности, обучение и развитие сотрудников ведутся на основе оценки их компетенций. Система Единых корпоративных требований (ЕКТ) была задумана и реализована в ОАО «РЖД» как механизм повышения эффективности управления персоналом через оценку профессиональных и корпоративных компетенций работников, их результативности и потенциала.
Оценка производится в автоматизированной системе. На основе полученных результатов строится планирование дальнейшего развития и обучения работников.
Флагманом внедрения системы ЕКТ в ОАО «РЖД» выступила Дирекция тяги. С 2013 года на её базе тестировалась методология разработки и оценки профессиональных компетенций, а также обкатывалась работа системы в целом. К настоящему времени в Дирекции тяги оценку получили более 3200 работников разных должностей – от первого заместителя филиала до помощников машинистов.
Вторым филиалом, который приступил к промышленной эксплуатации системы ЕКТ, стала Центральная дирекция управления движением. В общей сложности в 2015 году оценочные процедуры прошли порядка 800 работников ЦД.
Внедрение системы ЕКТ в других филиалах и подразделениях компании будет осуществляться по мере создания моделей профессиональных компетенций. Уже сейчас в работу включились Центр фирменного транспортного обслуживания и Главный вычислительный центр, разработана модель профессиональных компетенций социально-кадрового блока.
Важно отметить, что оценка ради оценки – это нецелесообразное и в некотором роде даже вредное мероприятие. Результаты оценки обязательно должны иметь практическое применение: в процессе формирования кадрового резерва, обучения и развития работников, отбора кандидатов для назначения на должности.
Например, по результатам пилотной оценки 2014 года в Московской дирекции тяги были скорректированы отдельные программы обучения, а в Западно-Сибирской дирекции для тех работников, которые показали низкие результаты по оценке ЕКТ, были сформированы индивидуальные планы развития с регулярными встречами-отчётами по их выполнению.
Цель этой статьи – показать, как на практике руководитель может использовать результаты оценки по системе ЕКТ при работе с кадровым резервом, а также при обучении и развитии работников.
Формирование кадрового резерва
При формировании кадрового резерва, когда нужно рассмотреть большой круг кандидатов, необходимо использовать все доступные инструменты оценки: и результаты ассесмент-центра, и оценку по корпоративным и профессиональным компетенциям, и оценку потенциала кандидата, результативность его деятельности. На основе сравнительного массового отчёта нужно сначала отобрать работников с высокими и средними результатами оценки, а затем выбрать из них наиболее соответствующих вакантной должности по профессиональному опыту и эффективности работы.
Назначение кандидата на должность
При выборе кандидата на должность руководитель может использовать разные подходы, но в целом алгоритм сводится к нескольким основным этапам:
1. Провести отбор работников на соответствие требованиям к вакантной должности по компетенциям и результатам деятельности на предыдущих должностях.
2. Исключить работников с низкими оценками по наиболее значимым для должности компетенциям.
3. Выбрать наиболее подходящего работника со средними или высокими оценками по ключевым для должности компетенциям.
4. Провести с кандидатом структурированное интервью по компетенциям для уточнения уровня развития компетенций.
Планирование обучения
Алгоритм действий при планировании обучения работников на основе компетенций строится в несколько основных этапов:
1. Анализируются результаты оценки, полученные в системе ЕКТ.
2. Определяются приоритетные зоны развития работника по конкретным компетенциям.
3. Формируются группы работников по направлениям (программам) обучения.
4. Выбираются образовательные программы (очные, дистанционные).
5. Составляются планы обучения и расчёт бюджета.
Развитие подчинённых
Во многих российских и иностранных организациях сформировалось убеждение, что постоянное развитие на рабочем месте является необходимостью в условиях меняющейся рыночной ситуации, возрастающей
конкуренции и демографических проблем. Помимо этого забота о развитии работника является практичным и полезным инструментом для повышения его лояльности и вовлечённости в работу.
Обычно под развитием персонала понимается комплекс мероприятий, направленных на формирование у работников эффективных моделей поведения (управленческих и профессиональных), которые позволят
компании быть успешной на рынке в краткосрочной и долгосрочной перспективе.
Ведущая роль в подборе целей и инструментов развития персонала принадлежит непосредственному руководителю, ведь именно он каждый день наблюдает за успехами и ошибками своих сотрудников. Применение большинства инструментов развития не требует от компании ощутимых финансовых затрат, некоторые инструменты вообще бесплатны. Необходимое условие эффективного применения всех этих инструментов – высокий уровень мотивации как самого работника, так и его руководителя.
У руководителей существует опасение, что работа по развитию подчинённых будет отнимать у них слишком много времени. Это не так.
Как показывает практика, кураторство над одним подопечным в месяц занимает не более 1,5–2 часов, притом что одновременно комплексно развивать необходимо не всех сотрудников, а только наиболее приоритетных. Такими могут быть как отстающие, так и наиболее перспективные работники. Важно рассматривать время, вложенное в развитие персонала, как инвестицию, ведь впоследствии руководитель может делегировать перспективным подчинённым дополнительные полномочия и ответственность.
Роли и ответственность в управлении развитием персонала у руководителей подразделений и HR-специалистов различаются. В сфере ответственности руководителя – инициирование проектов по развитию персонала, освоение базовых знаний и навыков, необходимых для развития персонала, регулярное проведение встреч с работниками для обсуждения их развития. В свою очередь, HR-специалисты должны инициативно формировать предложения по запуску процессов развития, обеспечивать их методическую и консультационную поддержку, контролировать графики реализации мероприятий.
Практикум: определяем цели развития
Приступая к планированию целей развития работника, помните, что на эффективность его деятельности оказывают влияние не только навыки и знания. Иногда вместо обучения и развития необходимо принять меры организационного характера (изменение мотивации, нейтрализация организационных барьеров).
Определить цели развития можно двумя способами. Результаты оценки Единых корпоративных требований и функциональные задачи работника сопоставляются с уровнем развития его компетенций, и для дальнейшего совершенствования выбираются те навыки и знания, которые критично необходимы для эффективной работы.
При отсутствии оценок применяется иной подход. В этом случае необходимо исходить из актуальной производственной проблемы, которая неоднократно возникала в деятельности работника. Эту проблему следует декомпозировать в одну или несколько задач. Далее определяются навыки и знания, которые влияют на успешное решение этих задач. Это и есть приоритетные зоны развития. При этом рекомендуется в один период времени развивать не более двух-трёх компетенций.
Выбор целей развития и развивающих действий осуществляется руководителем совместно с работником либо работником самостоятельно (и обсуждается с руководителем впоследствии). Во время обсуждения устанавливаются промежуточные и итоговые сроки контроля. Важно, что сам план развития формируется работником и непосредственным руководителем, специалист по управлению персоналом лишь участвует и помогает в этом.
В компаниях, где внедрены практики по развитию персонала, руководители, как правило, владеют на том или ином уровне навыками коучинга. Руководители-коучи редко задают вопросы, начинающиеся со слова «почему». Чаще оперируют вопросами «как?» и «что?» Например, при обсуждении задач (результатов работы, трудностей) подчинённым можно задавать следующие вопросы:
1. Какими вы видите свои дальнейшие действия по решению этой проблемы? Какие есть возможности?
2. Каково ваше мнение о причинах недостаточной эффективности? Что надо было сделать иначе?
3. Кто-нибудь раньше решал успешно подобную задачу? Как он это делал?
4. Какие знания или навыки необходимы вам для решения этого вопроса?
5. Если бы вы были сторонним наблюдателем, что бы вы порекомендовали сделать?
6. При наличии всех необходимых ресурсов что бы вы сделали?
7. Если бы сейчас была возможность начать работу над этим проектом заново, с чего бы вы начали и как продолжили?
8. По каким признакам вы поймёте, что результат достигнут эффективным, оптимальным способом?
Впоследствии, когда навыки по развитию персонала станут привычными и автоматизируются, руководитель во время рабочих встреч с подчинёнными сможет одновременно контролировать качество выполнения текущих задач, оценивать работника, повышать степень его вовлечённости в самостоятельный поиск решений и уровень мотивации. Достижение максимального результата оптимальными ресурсами – это и есть эффективность.